PCR Buffer

PCR được thực hiện trong một hệ đệm nhằm cung cấp môi trường thích hợp cho hoạt động của DNA polymerase.

Độ pH của đệm thường dao động từ 8.0 đến 9.5 và thường được ổn định bằng Tris-HCl. Đối với Taq DNA polymerase, một thành phần phổ biến trong đệm là ion kali (K+) từ KCl, giúp thúc đẩy quá trình ủ mồi. Đôi khi, amoni sulfat (NH4)2SO4 có thể thay thế KCl trong đệm. Ion amoni (NH4+) có tác dụng làm mất ổn định, đặc biệt là đối với các liên kết hydro yếu giữa cặp base-khuôn mẫu mồi không khớp, do đó tăng cường tính đặc hiệu.

Các DNA polymerase khác nhau thường đi kèm với bộ đệm PCR đã được tối ưu hóa nhằm tăng cường hoạt động của enzyme; do đó, nên sử dụng bộ đệm được cung cấp để đạt được kết quả PCR tối ưu.

Phù Sa cung cấp 03 loại Buffer thông dụng bao gồm:

• PCR Buffer chứa KCl (10X): 100 mM Tris-HCl, 500 mM KCl, 15 mM MgCl2 (pH 8,3)
• PCR Buffer chứa KoAC (10X): 100 mM Tris-HCl, 750 mM KoAC, 15 mM MgCl2 (pH 8,5)
• PCR Buffer chứa (NH4)2SO4 (10X): 750 mM Tris-HCl, 200 mM (NH4)2SO4, 0,1% (v/v) Tween 20, 15 mM MgCl2 (pH 8,8)